Прикладная школа-семинар по жидкостной хроматографии «Разработка и трансфер ВЭЖХ-методик»

26-29 сентября

ШКОЛА ПО ВЭЖХ 2017

г. ТОМСК
О чем школа?
ШКОЛА ПО ВЭЖХ 2017

В практике фармацевтических предприятий известно много случаев, когда при небольшом изменении условий анализа (состава и рН подвижной фазы, выборе колонки другого производителя) ВЭЖХ-методики не воспроизводятся, или работают нестабильно. Причина - неустойчивые (неробастные) ВЭЖХ разделения.


Валидация и трансфер таких методик часто заканчивается неудачей, что существенно затягивает срок начала производства нового препарата.

Школа посвящена разработке устойчивых ВЭЖХ-разделений — ключевому условию успешного прохождения валидации и трансфера методик анализа. Будет изложен авторский унифицированный подход «в три шага» для разработки устойчивых ВЭЖХ разделений.
Школа для разработчиков ВЭЖХ методик посвящена созданию устойчивых ВЭЖХ-разделений — ключевому условию успешного прохождения валидации и трансфера методик анализа. Отдельный модуль будет посвящен разработке разделений оптических изомеров на хиральных колонках. Четвертый день будет посвящен исключительно практике.
Эксперт

к.х.н. Сычев К.С. (автор учебников «Практическое руководство по ВЭЖХ», «Подготовка пробы для ГХ и ВЭЖХ», «Практический курс жидкостной хроматографии», «Авторские ноу-хау в ВЭЖХ», «HPLC Unveiled»)
Для кого?

Для специалистов по жидкостной хроматографии, разработчиков ВЭЖХ- методик, специалистов ЦЗЛ фармацевтических предприятий
Количество участников ограничено
Работа в небольшой группе, обсуждение вопросов и проблем участников
ЭКСПЕРТ
Константин Сычев, к.х.н.
В рамках школы Константин суммирует 27-леткий опыт в области разработки и трансфера ВЭЖХ методик, делится практическими навыками по решению разноплановых проблем, возникающих при разработке и модернизации ВЭЖХ разделений.
Темы семинара:
Разработка устойчивых разделений в адсорбционных (RP, NP, HILIC, IC, CT, LEC) и эксклюзионных (SEC, IEX) режимах
Работа в смешанных режимах обращенно-фазовой (RP/HILIC, RP+IC, RP/CT, RP + SEC), гидрофильной (HILIC + IC) и нормально-фазовой хроматографии (NP/CT)
Как бороться с плохой воспроизводимостью ион- парных разделений
Программа прикладной школы-семинара по жидкостной хроматографии 2017 «Разработка и трансфер ВЭЖХ-методик»
Специфичность в ВЭЖХ
- Специфичность определения. Специфичность хроматографического разделения и специфичность детектирования.
- Классификация выполняемых анализов по характеру поставленной цели: рутинные (targeted) и исследовательские (untargeted) разделения. Различие в подходах к решению аналитических задач обоих типов.
- Виды детектирования, применяемые в ВЭЖХ. Оптические, испарительные, электрохимические, масс-селективные детекторы. Преимущества и недостатки различных видов детектирования.
- Принцип выбора детектора с оптимальной для данной аналитической задачи специфичностью.
- Способы ВЭЖХ детектирования, недооцененные в фармацевтическом анализе.
Качественный и количественный анализ
- Основы качественного анализа. Проверка отрицательной гипотезы. Идентификация соединений. Способы повышения надежности идентификации соединений: хроматографические и спектральные. Ограничения процедуры "peak purity test", реализуемой на диодно-матричных детекторах.
- Проведение разметки хроматограммы. Различные способы проведения разметки; параметра разметки.
- Функции автоматической разметки. Настройка автоматической разметки.
- Основы количественного анализа. Основы статистики. Методы внутреннего и внешнего стандартов. Отклик детектора. Одноточечная и многоточечная градуировки, целесообразность их применения в различных случаях. Одноточечная градуировка. Доверительный интервал. Типы многоточечной градуировки. Модели аппроксимации. Линейная аппроксимация и ее параметры. Типичные затруднительные ситуации и ошибки, допускаемые при применении многоточечной градуировки с аппроксимацией линейной регрессией.
Разработка хроматографического разделения. Основные режимы хроматографии
- Основные параметры разделения. Факторы, определяющие разрешение пары пиков.
- Оптимальное удерживание. Оптимальная селективность. Оптимальная эффективность.
- Общий алгоритм разработки ВЭЖХ методики.
- Основные адсорбционные (RP, NP, HILIC, IC, CT, LEC) и эксклюзионные (SEC, IEX) режимы жидкостной хроматографии.
- Модель удерживания для обращенно-фазового (RP) режима. Регулирование удерживания и селективности. Преимущества и недостатки обращенно-фазовой хроматографии.
- Модель удерживания для нормально-фазового (NP) и гидрофильного (HILIC) режимов. Регулирование удерживания и селективности.
- Модель удерживания для ионного (IC) режима. Регулирование удерживания и селективности.
- Буферные растворы, применяемые в ВЭЖХ. Выбор буфера. Выбор концентрации и ионной силы.
Смешанные хроматографические режимы. Работа с ион-парными системами
- Смешанные ВЭЖХ режимы, широко применяемые на практике. Понимание характерной (уникальной) селективности ВЭЖХ неподвижной фазы как следствия смешения двух или более ВЭЖХ режимов.
- Преимущества и недостатки смешанных режимов. Целесообразность их применения.
- Смешанные режимы в обращенно-фазовой хроматографии (RP/HILIC, RP+IC, RP/CT, RP + SEC).
- Смешанные режимы в гидрофильной хроматографии (HILIC + IC).
- Смешанные режимы в нормально-фазовой хроматографии (NP/CT).
- Регулирование доли каждого из вкладов в смешанном режиме.
- Применение динамического модифицирования для перехода к смешанным режимам.
- Ион-парные системы, их преимущества и недостатки. В каких случаях применяют добавки ион-парных реагентов. Насколько применение ион-парного режима вообще оправдано.
- Как работают добавки ион-парных реагентов; какие ион-парные реагенты наиболее популярны.
- Как бороться с плохой воспроизводимостью ион-парных разделений.
- Совместимы ли ион-парные разделения и градиентное элюирование.
- Как можно удешевить ион-парное разделение.
- Как уйти от применения ион-парной добавки.
- Техника работы при использовании ион-парных реагентов.
Оценка удерживания и селективности разделения соединений
- Оценка удерживания соединения в основных и смешанных режимах по его структурной химической формуле.
- Сложные случаи при анализа многокомпонентных лекарственных средств. Проведение разделения при наличии в смеси веществ разной природы (ионные/неионные, полярные/неполярные и др.). Примеры из фармацевтической отрасли.
Неподвижные фазы в ВЭЖХ
- Современное состояние рынка неподвижных фаз (НФ): обзор. НФ различного типа для обращенно-фазовой (RP), гидрофильной (HILIC) и ионной (IC) хроматографии.
- Есть ли смысл в разнообразии неподвижных фаз. Зачем для одного вида хроматографии выпускают неподвижные фазы с различными типами прививок. Зачем нужны колонки различных типоразмеров, то есть разной длины и с разным размером частиц. Существуют ли "самые лучшие" колонки
- Что подразумевается под "качеством" колонки. Какую колонку можно считать качественной. Какие признаки свидетельствуют о нарушениях в технологии упаковки колонок. В каких случаях можно попытаться заменить плохо упакованную колонку у производителя. Как обезопасить себя от покупки плохо изготовленной колонки
- Какие основные типы обращенных фаз доступны на рынке. Какие существуют типы прививок для обращенно-фазовых силикагелей. Чем определяется величина удерживания на данной обращенной фазе? В чем состоит преимущество алкиламидных (С16-Amide и подобных ей) фаз. В чем состоит преимущество арил-привитых (PFP, PYE и подобных им) фаз. В чем состоит преимущество алкил-привитых фаз с ионными группами (C18/SAX, C18/SCX, C18/WCX).
- Что такое энд-кеппинг. Какими преимуществами обладает полярный энд-кеппинг. Как узнать тип энд-кеппинга обращенной фазы. Что обозначают различные аббревиатуры в названиях обращенно-фазовых колонок. Какие бывают химии полимерных обращенных фаз. Почему фазы на основе силикагеля применяют чаще полимерных фаз. В чем состоят преимущества и недостатки применения поверхносто-пористых обращенных фаз.
- Названия хроматографических колонок. Что обозначают различные аббревиатуры и сокращения в на- звании колонок.
- Тестирование обращенно-фазовых (RP) ВЭЖХ колонок.
- Как выбрать «колонку, аналогичную данной».
Градиентное элюирование в ВЭЖХ
- Градиентное элюирование в обращенно-фазовой хроматографии. Выбор профиля градиента.
- Техника проведения градиентного элюирования.
- Область применения градиентного элюирования. Ограничения градиентного элюирования.
Оптимизация ВЭЖХ-разделений
- Оптимизация ВЭЖХ разделения. Критерии оптимизации.
- Теория скоростей. Гидродинамика ВЭЖХ разделения. Алгоритм выбора оптимальной скорости потока.
- Алгоритм выбора оптимальной длины колонки и размера частиц адсорбента.
- Факторы, определяющие «дополнительное» уширение хроматографических пиков. Мертвые объемы. Перегрузка объемом пробы и количеством вещества.
- Факторы, влияющие на уширение хроматографических пиков. Правильная сборка жидкостной системы. Типы капилляров и фитингов, их правильное применение.
Разделение оптических изомеров. Работа с хиральными колонками.
- Оптические изомеры. Энатиомеры. Диастереомеры.
- Хиральные сорбенты. Классификация. Аббревиатуры и сокращения в названии коммерческих хиральных колонок.
- Разработка разделений. Механизмы разделения. Как выбрать хиральную колонку для разделения оптически активных изомеров исходя из их структуры?
- Предосторожности при работе с хиральными колонами.
- Регулирование селективности разделения изомеров на хиральных неподвижных фазах.
- Практические примеры хиральных разделений в фармацевтической отрасли.
Робастность и трансфер ВЭЖХ-методик
- Обеспечение прослеживаемости измерений в ВЭЖХ.
- Как на практике выглядит пригодное ВЭЖХ разделение. Критерии пригодности хроматографической системы.
- Квалификация протокола обработки данных. Различия в расчете параметров разделения (отношение сигнал/шум, эффективность, асимметрия, разрешение) по «стандартному» набору формул, формулам EP и формулам USP.
- Основы валидации ВЭЖХ методик. Валидационные характеристики.
- Специфичность. Протокол валидации специфичности.
- Робастность. Особенности валидации робастности. Протокол валидации робастности. Упущения при валидации робастности как одна из основных причин невоспроизводимости ВЭЖХ методик. Как распознать неробастную методику.
- Подтверждение линейности. Определение пределов обнаружения/ определения. Способы уменьшения пределов обнаружения/определения.
- Валидация правильности. Рабочий диапазон методики. Отличие нижней границы рабочего диапазона от предела определения.
- Оформление методики согласно международным рекомендациям.
- Трансфер ВЭЖХ методик. Протокол трасфера. Основные проблемы при трансфере методик. Неробастные ВЭЖХ измерения как основная причина затруднений при трансфере ВЭЖХ методик.
Практическая часть: разработка методики определения смеси фармацевтических соединений в твердой лекарственной форме
- Анализ химических структур целевых соединений, выявление их основных адсорбционных свойств. Выбор подходящих хроматографических режимов для разделения смеси целевых веществ. Выбор оптимальных способов регулирования селективности разделения.
- Проведение пробных разделений на выбранных неподвижных фазах в выбранных условиях. Расчет факторов удерживания, селективностей и разрешения критических пар. Выбор решения с оптимальной селективностью.
- Оптимизация разделения. Выбор скорости потока, длины колонки, диаметра частиц адсорбента.
- Валидация специфичности разделения.
- Расчет и формулирование критериев пригодности хроматографической системы.
Хиральная хроматография
Впервые будет прочитан модуль по разработке ВЭЖХ разделений оптических изомеров на хиральных колонках. Как известно, ошибки в хиральной хроматографии (выбор неправильной колонки, быстрый выход колонок из строя) могут стоить особенно дорого (стоимость типичной колонки 500 т.р.)
Трансфер
Ключевое условие успешного трансфера — устойчивая методика, поэтому основная часть школы посвящена именно разработке методик. Будут проанализированы основные причины проблем при трансфере методик и способы их устранения.
Условия участия
Получите скидку при оплате до 1 августа!
Количество участников ограничено
Подайте заявку на участие
Количество участников
+
Введенные данные не будут переданы третьим лицам
По вопросам о семинаре, программе
Дмитрий Новиков, зав. ЛФХМА ТГУ
lpcma.tsu@gmail.com

По вопросам оплаты, заключения договоров
Оператор школы ООО «ИХТЦ» Менеджер проекта Ксения Коломейцева, office@ect-center.com, тел. (3822) 90−99−69
Made on
Tilda